克隆构建是分子生物学研究中最常用的技术手段之一。我们给予克隆构建及其上下游相关服务的整体解决方案，并根据目的基因来源灵活选择不同的克隆方法，包括从基因组中分离目的基因、由特定 mRNA 逆转录合成 cDNA 后进行克隆，以及顺利获得 PCR 体外扩增目的片段进行克隆等。

1、载体构建

可根据现有载体设计改造方案，实现载体不同功能元件的优化与改造；也可根据客户需求，将指定片段亚克隆至目标载体中。

（1）您需要给予：载体改造的具体要求；待改造质粒（经测序验证序列正确）、其图谱及序列；以及获取目标元件或基因的模板（质粒或其他来源）及相关图谱和序列。

（2）我们给予：构建完成的质粒、菌种以及测序验证报告。

2、ORF克隆

从动物组织或细胞中提取 mRNA，顺利获得 RT-PCR 扩增取得目标基因；或给予质粒模板，顺利获得 PCR 扩增取得目标基因，并将其克隆至客户指定载体中。

（1） 您需要给予：目的基因序列，或可获取该序列的质粒/总 RNA。

（2） 我们给予：设计方案、引物合成，以及最终含目标基因的质粒、菌种和测序验证报告。

3、PCR产物克隆

直接将客户给予的PCR产物（含或不含相应酶切位点）克隆至指定载体中。

（1） 您需要给予：总量不少于1 μg的PCR产物。

（2） 我们给予：含有目的片段的质粒和菌种及测序验证报告。

4、定点突变

体外定点突变技术是研究蛋白质结构与功能关系的有力工具，也是实验室中改造和优化基因的常用手段，可实现碱基的添加、删除或替换等。

（1） 您需要给予：原始质粒、质粒图谱（含大小信息）、序列以及突变位点要求

（2）我们给予：突变成功的质粒、菌株及测序报告。

实验室已成功构建的质粒包括：真核表达质粒、原核表达质粒、报告基因质粒、RNA干扰质粒等。